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同型半胱氨酸(Homocysteine)檢測試劑簡介
日期:2011-05-19 00:00:00
孫衛兵(復星長征 上海 200433)
[生之源]同型半胱氨酸是一種含硫的氨基酸,在人體內并非為必需的氨基酸,主要是由蛋氨酸代謝過程中去甲基化所生成的中間產物之一。同型半胱氨酸再經甲基化路徑合成蛋氨酸或經轉硫路徑代謝生成半胱氨酸。血漿中同型半胱氨酸以氧化型和還原型兩種形式存在。其中以與蛋白質結合的氧化型為主要存在形式,約占80%。血漿中的同型半胱氨酸的濃度受到許多因素影響,其中包括遺傳、營養的攝取,年齡,性別,生活習慣,疾病與藥物等。
許多研究發現同型半胱氨酸與心血管疾病及中風有密切的關系,體內高同型半胱氨酸濃度視作為心血管疾病的獨立危險因子,它會造成血管內脾細胞的損傷而導致發炎,并刺激血管壁的細胞增生,進而造成血管的堵塞,增加血栓形成的機率從而導致心血管疾病或中風的發生。Boushey 等人針對27個研究報告,其中包含超過 4000 例的檢測者進行 meta 分析,結果顯示血漿中同型半胱氨酸濃度升高 5 微摩,男性患冠心病的 OR 值(ODDS RATIO)為 1.6 倍,女性為 1.8 倍;患腦血管疾病的 OR 值為 1.5 倍,而周圍血管疾病也具有明顯的相關性。
血漿中同型半胱氨酸十分穩定,在室溫下可穩定數天,如血漿冷凍于-20度可保存 5 年以上時間。但其濃度會依靠檢體收集后全血放置時間的不同而有所差異,如采集后的全血放置室溫 1 小時后再進行離心,分離出的血清,其同型半胱氨胺酸濃度會上升 10%,而室溫放置 24 小時后,其濃度會上升 190%。所以檢測同型半胱氨酸最佳的檢體采樣方式為將收集的全血放置于 2-8 度,并于30 分鐘內離心,分離出血清保存。
檢測試劑的反應原理
以還原劑將氧化態的同半胱氨酸還原,再以基因重組的同型半胱氨酸酶將同型半胱氨酸分解,分解產物之一硫化氫與呈色劑、氧化劑反應生成藍色化合物,其在 660nm 處顯色。
檢測試劑性能
本實驗采用上海復星長征醫學科學有限公司的同型半胱氨酸試劑盒(內含相應的校準品和質控品)批號:D070823,D070617,D071204
自動生化檢測分析儀:奧林巴斯 AU400
試劑的檢測結果
一、精密度
1、批內精密度
2、批間精密度
二、靈敏度
檢測低限(Detection limit)為 0.1μM,功能靈敏度(Function sensitivity)為0.5μM。
三、線性范圍
可檢測范圍 1-40μM 的樣本。取 40μM 的樣本進行10點線性稀釋后測定,每點測 3 次,取其平均值,計算相關方程及相關系數。
相關方程:Y=0.9875X+0.232
相關系數:R=0.9994
四、臨床樣本相關性
檢測 50 例左右的臨床樣本(同型半胱氨酸的樣本濃度覆蓋檢測范圍)
1、與 HPLC 法相關性
相關方程:Y=0.9004X+1.8702
相關系數:R=0.997
2、與雅培 Axsym 法相關性
相關方程:Y=0.9745X+0.2231
相關系數:R=0.9683
五、正常人參考范圍
對 229 例正常樣本(雅培 Axsym 試劑檢測為正常值)進行檢測,經數據統計后,得
根據 95%的百分位法計算得正常人的參考范圍為0-18μM。
同型半胱氨酸作為心血管檢驗的重要指標在臨床上越來越受到臨床檢驗醫師和臨床醫生的重視。上海復星長征醫學科學有限公司開發的同型半胱氨酸試劑盒具有省時、省工、便利、準確度好,靈敏度高等特點,能滿足廣大臨床的需求。因試劑方法自有的特點,試劑在臨床使用時需注意二點。一、檢體的及時收集和分離,最好使用含分離膠的采血管;二、因工作試劑的穩定時間僅能穩定 2 天,為了提高臨床的準確性,試劑使用時需每天對其進行定標。
參考文獻1 Blacher J,Benetos A(2002)Relation of plasma total homocysteine to cardiovascular Mortality in a French Population.Am J Cardio 90,591-595
2 Clark R,Daly L,Robinson K,et al(1991) Hyperhomocysteinemia:an independent risk factor of vascular disease.N Engl J Med 324,1149-1155.
3 Miller JW(2002) Homocysteine,folate deficiency,and Parkinsons disease. NutrRev 60,410-413.[生之源]
來源:上海復星長征醫學科學有限公司
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